В лечебных учреждениях Советского Союза для определения неполных блокирующих резус-антител и их титра применяется проба Кумбса в модификации Центрального научно-исследовательского института переливания крови. Исследование непрямой пробой Кумбса неполных антител состоит из двух самостоятельных манипуляций: определения наличия и определения титра неполных блокирующих резус-антител. Оба исследования могут производиться одновременно. Определение неполных блокирующих резус-антител в крови сенсибилизированных к …

Кровь берется в пробирки в среднем по 5 мл, без стабилизатора. При хранении сывороток возможно снижение титра резус-антител, поэтому исследование старых сывороток может дать неправильный результат. Если исследование сыворотки в день взятия крови невозможно, ее необходимо законсервировать кристаллической борной кислоиз расчета 4% консерванта и хранить в холодильнике при температуре +4°. Для того чтобы исключить высыхание …

После инкубирования смеси исследуемых сывороток со стандартными эритроцитами последние трижды отмываются в физиологическом растворе. Для этого все пробирки доливаются доверху физиологическим раствором и их содержимое перемешивается путем переворачивания. После этого пробирки центрифугируются при 1000 — 1500 об/мин до полного осаждения эритроцитов (обычно 5 мин). Затем надосадочная жидкость полностью удаляется путем отсасывания и пробирка снова наполняется …

Для контроля активности и специфичности антиглобулиновой сыворотки необходимо параллельно с исследованием ставить контроль с сенсибилизированными и несенсибилизированными стандартными резус-положительными эритроцитами. Сенсибилизация эритроцитов производится сывороткой антирезус, в которой заведомо содержатся неполные блокирующие антитела антирезус. Результат учитывается через 5 мин по наличию или отсутствию реакции агглютинации в каплях исследуемых сывороток со стандартными резус-положительными и резус-отрицательными эритроцитами. При …

Подготовка к определению титра неполных блокирующих резус-антител методом непрямой пробы Кумбса не отличается от подготовки к определению наличия резус-антител в исследуемой сыворотке. В штативе устанавливаются 10 пробирок диаметром 6 — 8 мм, высотой 80 — 100 мм, на которые наносятся обозначения титра от 1:2 на первой до 1:1024 на последней пробирке. При необходимости произвести титрование …

Из всех пробирок соответственно их расположению в штативе слева направо на тарелку (или белую пластину) переносится по 1 капле 5%-ной взвеси эритроцитов и к каждой капле прибавляется по 1 капле антиглобулиновой сыворотки, которая тщательно перемешивается с эритроцитами стеклянными палочками или углами предметных стекол. При определении титра неполных блокирующих антител антирезус, как и при исследовании их …

Исследование полных резус-антител, так же как и неполных, состоит из двух самостоятельных манипуляций, которые могут проводиться раздельно или одновременно: определения их наличия и определения титра. Определение наличия полных резус-антител Для исследования полных резус-антител солевой методикой требуются: стандартные резус-положительные и резус-отрицательные эритроциты; физиологический раствор хлористого натрия для разведения исследуемой сыворотки; термостат (+37°); пробирки диаметром 5 — …

Допускается взятие крови и без стабилизатора. При этом необходимо иметь в виду, что большая часть эритроцитов остается в сгустке крови, поэтому брать ее следует несколько большее количество. Из дважды отмытых стандартных резус-положительных и резус-отрицательных эритроцитов в физиологическом растворе приготовляется 2%-ная взвесь (1 капля отмытых стандартных эритроцитов и 49 капель физиологического раствора). Для проведения реакции определения …

При положительном результате осадок эритроцитов располагается на дне пробирки неравномерным слоем. Осадок шероховат, в ряде случаев отчетливо видна рубчатость его структуры. Края осадка изогнуты, иногда завернуты внутрь. В некоторых случаях эритроциты могут располагаться вокруг более светлого центра дна пробирки в виде волнистого венчика. При отрицательном результате осадок располагается равномерным слоем, без шероховатостей и изрезанности краев. …

Подготовка к определению титра полных резус-антител такая же, как и к определению наличия их. В штатив устанавливаются 10 маленьких пробирок (диаметром 5 — 6 мм, высотой 20 — 25 мм). Против каждой пробирки на листе бумаги, которым накрывается штатив, надиисываются (слева направо) обозначения титра от 1:2 в первой пробирке до 1:1024, в последней. Число рядов …