Исследование водно-солевого обмена
Унифицированный метод определения фосфора по восстановлению фосфорно-молибденовой гетерополикислоты Принцип метода Белки осаждают трихлоруксусной кислотой, в кислой среде фосфорная кислота образует с молибденовой кислотой фосфорно-молибденовую гетерополикислоту, которая восстанавливается эйконогеном с образованием ярко окрашенного молибденового синего. Необходимые реактивы I. Кислота трихлоруксусная, раствор 100 г/л (10%). II. Кислота серная 5 н. III. Аммоний молибденовокислый, 5%-ный раствор готовят, растворяя …
К 1 мл прибавляют 4 мл воды и 5 мл раствора трихлоруксусной кислоты, через 10 мин центрифугируют или фильтруют. К 5 мл безбелкового фильтрата добавляют 1 мл раствора молибденовокислого аммония, 0,2 мл раствора эйконогена и 1,8 мл воды. Через 20 мин фотометрируют при длине волны 630—690 нм в кюветах с длиной оптического пути 1 см …
Принцип метода Неорганический фосфор образует с молибденовой кислотой фосфорномолибденовую гетерополикислоту, которая, реагируя с основным красителем — малахитовым зеленым, дает зеленовато-синее окрашивание. Если фосфора нет, то малахитовый зеленый в кислой среде окрашен в желто-коричневый цвет. Белок не мешает проведению реакции, поэтому депротеинизацию не проводят, для обеспечения коллоидной устойчивости образовавшегося комплекса в раствор добавляется твин 20. Необходимые …
Унифицированный метод определения фосфора после осаждения белков трихлоруксуснои кислотой Принцип метода. При осаждении белков крови трихлоруксусной кислотой все фосфолипиды осаждаются вместе с белковым сгустком, а неорганический и кислоторастворимый фосфор остаются в растворе. Белковый сгусток минерализуется нагреванием с хлорной кислотой и фосфор определяется эйконогеновым методом. В связи с тем, что белки плазмы не содержат фосфора, весь …
К 0,2 мл исследуемой сыворотки добавляют 3 мл воды и медленно 3 мл 10%-ного раствора трихлоруксусной кислоты, через 1—2 мин центрифугируют, надосадочную жидкость сливают — пробирку переворачивают и дают стечь жидкости. К осадку добавляют 1 мл 57%-ной хлорной кислоты, если ее концентрация ниже, соответственно увеличивают количество кислоты, переносят в колбу или в большую пробирку для …
Есть два способа приготовления калибровочных растворов. В первом случае сначала готовят серию основных калибровочных растворов, концентрации электролитов в которых перекрывают возможный диапазон колебаний состава плазмы, а затем эти растворы разводят так же, как и исследуемую плазму. Этот способ позволяет в максимальной степени избежать погрешностей, связанных с неточностями пипеток, используемых при разведении, но необходим двойной набор …
При определении калия в плазме крови очень важно, чтобы не было гемолиза, так как эритроциты значительно богаче этим элементом, чем плазма, и разрушение даже небольшого их количества приводит к завышенным результатам. Если есть хоть малейшее сомнение в том, что эритроциты удалены полностью, плазму или сыворотку надо повторно центрифугировать. В связи с тем, что калий, хотя …
Принцип метода Определение натрия и калия в моче аналогично их определению в плазме крови с той разницей, что размах физиологических колебаний здесь больше, а различие между концентрациями Na и К не так велико, как в плазме, поэтому требования к точности меньше и можно работать с общим калибровочным раствором. Приготовление калибровочного раствора Используют те же исходные …
Принцип метода Эритроциты отделяют центрифугированием, гемолизируют водой и определяют содержание электролитов методом фотометрии пламени. В связи с тем, что между эритроцитами всегда остается некоторое количество плазмы, большое значение имеет единообразие режимов центрифугирования, приведенный ниже режим рекомендован в качестве унифицированного. Приготовление калибровочных растворов В качестве исходных используют те же растворы, что и при определении натрия и …
Кальций — основное компонент костной ткани и зубов, участвует в свертывании крови, сокращении мышц, деятельности некоторых эндокринных желез. Всасывание и выведение кальция находится под контролем гормонов (кальцитонин, паратиреоидный гормон) и активных метаболитов витамина D. 99% кальция находится в костях, где он вместе с фосфором образует кристаллы гидроксиапатита, составляющего минеральную основу скелета. Несмотря на то что …
