Питание и здоровье
Питание и здоровье

Особенности питания различных групп людей

Медицина в фото
Медицина в фото

Уникальные медицинские фото: органы, болезни, паразиты

Планирование беременности и зачатие
Планирование беременности

Рождение ребенка – важный шаг в жизни каждой семьи

Справочник по психиатрии
Справочник по психиатрии

Симптомы, диагноз, развитие, лечение

Унифицированный метод определения в эритроцитах

Принцип метода

Эритроциты отделяют центрифугированием, гемолизируют водой и определяют содержание электролитов методом фотометрии пламени. В связи с тем, что между эритроцитами всегда остается некоторое количество плазмы, большое значение имеет единообразие режимов центрифугирования, приведенный ниже режим рекомендован в качестве унифицированного.

Приготовление калибровочных растворов

В качестве исходных используют те же растворы, что и при определении натрия и калия в плазме.

I.  Рабочий калибровочный раствор для определения калия в эритроцитах.

В мерную колбу вместимостью 100 мл вносят 3,84 мл исходного калибровочного раствора КСl, содержащего 100 ммоль/л, и доводят объем водой до 100 мл, получается основной калибровочный раствор с концентрацией 3,84 ммоль/л. Из него готовят разведения согласно табл.

Определение электролитов в эритроцитах

Раствор KCl 3,84 ммоль/л (мл)
Вода (мл)
Концентрация калия (ммоль/л)
Соответствует содержанию калия в эритроцитах при разведении 1: 260 (ммоль/л)
7,5 до 100 0,288 75
8,0 до 100 0,308 80
8,5 до 100 0,327 85
9,0 до 100 0,346 90
9,5 до 100 0,365 95

II.  Рабочий калибровочный раствор для определения натрия в эритроцитах.

В мерную колбу вместимостью 1 л вносят 33 мл исходного калибровочного раствора КСl, содержащего 100 ммоль/л, и доводят до 1 л, получается фоновый раствор, содержащий 3,3 ммоль/л КСl. В колбу вместимостью 100 мл вносят 1 мл исходного калибровочного раствора NaCl, содержащего 1000 ммоль/л, и доводят до объема 100 мл фоновым раствором, содержащим 3,3 ммоль/л КСl, получается раствор, содержащий 10 ммоль/л NaCl и 3,3 ммоль/л КСl. Из полученных растворов готовят разведение согласно табл.

Определение натрия в эритроцитах

Раствор содержащий 10 ммоль/л KC1 (мл)
Фоновый раствор 3,3 ммоль/л KC1 (мл)
Концентрация ммоль/л
Соответствует содержанию натрия в эритроцитах при разведении 1 : 26 ммоль/л
K
Na
5 до 100 3,3 0,5 13,0
6 до 100 3,3 0,6 15,6
7 до 100 3,3 0,7 18,2
8 до 100 3,3 0,8 20,8

Ход исследования. Кровь для исследования берут с гепарином из расчета 5 мг (650 ЕД) на 1 мл, центрифугируют в течение 15 мин при скорости 3000 об./мин, отсасывают плазму с верхним слоем эритроцитов и снова центрифугируют в течение 30 мин при скорости 3000 об./мин и удаляют верхний слой.

Из упакованного слоя эритроцитов берут пробу, которую разводят водой для определения калия в 260 раз, а для определения натрия — в 26 раз. Пробы сжигают одновременно с калибровочными растворами. Расчет проводят по калибровочному графику.

Далее по теме: