Питание и здоровье
Питание и здоровье

Особенности питания различных групп людей

Медицина в фото
Медицина в фото

Уникальные медицинские фото: органы, болезни, паразиты

Планирование беременности и зачатие
Планирование беременности

Рождение ребенка – важный шаг в жизни каждой семьи

Справочник по психиатрии
Справочник по психиатрии

Симптомы, диагноз, развитие, лечение

Главная / Справочник по клинической лабораторной диагностике / Исследование водно-солевого обмена / Железо / Определение железа по цветной реакции с сульфонированным батофенантролином (ход исследования)

Определение железа по цветной реакции с сульфонированным батофенантролином (ход исследования)

К 2 мл исследуемой сыворотки прибавляют 2,5 мл воды и 1,5 мл 20%-ного раствора трихлоруксусной кислоты, перемешивают и ставят на 15 мин на водяную баню температуры 90—95 °С. Затем центрифугируют в течение 20 мин при скорости 2000 об./мин и отбирают 4 мл прозрачного слоя, к которым приливают 0,35 мл 70%-ного раствора аммония ацетата и 0,3 мл раствора сульфата гидразина. Смесь фотометрируют при длине волны 535 нм в кюветах с длиной оптического пути 1 см, затем прибавляют 0,4 мл раствора сульфонированного батофенантролина, оставляют на 1 ч и снова фотометрируют при той же длине волны. Обе фотометрии выполняют против холостого опыта, в котором берут вместо исследуемой сыворотки 2 мл воды.

Калибровку проводят так же, как и основной опыт, но вместо сыворотки берут 2 мл калибровочного раствора.

Расчет сывороточного железа (мкмоль/л) выполняют по формуле:

Еоп1 – Еоп2к1 – Ек2 *30,

где Еоп1 и Еоп2 — отсчеты опытной пробы до и после прибавления раствора сульфонированного батофенантролина;

Ек1 и Ек2 — соответственно результаты фотометрии калибровочной пробы;

30 — содержание железа в калибровочном растворе, мкмоль/л.

Надо тщательно следить за содержанием железа в дистиллированной воде и реактивах, используя в случае необходимости бидистиллированную воду, приготовленную в стеклянном перегонном аппарате. Если после удаления белков не удается набрать точно 4 мл надосадочной жидкости, можно взять меньшее ее количество и сделать поправку при расчете или же взять точно такое же количество калибровочного раствора.

Далее по теме: