Питание и здоровье
Питание и здоровье

Особенности питания различных групп людей

Медицина в фото
Медицина в фото

Уникальные медицинские фото: органы, болезни, паразиты

Планирование беременности и зачатие
Планирование беременности

Рождение ребенка – важный шаг в жизни каждой семьи

Справочник по психиатрии
Справочник по психиатрии

Симптомы, диагноз, развитие, лечение

Главная / Справочник по клинической лабораторной диагностике / Исследование водно-солевого обмена / Железо / Определение железа по цветной реакции с сульфонированным батофенантролином

Определение железа по цветной реакции с сульфонированным батофенантролином

Принцип метода

Белки осаждают трихлоруксусной кислотой, которая при прогревании разрушает также комплекс железа с трансферрином. Для установления оптимальной величины рН 4,8—5,0 добавляют аммония ацетат, а для восстановления всего железа — гидразин. Двухвалентное железо образует окрашенный комплекс с батофенантролином, который переведен в сульфатированную форму добавлением хлорсульфоновой кислоты.

Необходимые реактивы

I.  Трихлоруксусная кислота, 20%-ная.

II.  Аммония ацетат: 70 г ацетата аммония (CH3COONH4) растворяют в воде, объем доводят до 100 мл, препарат гигроскопичен.

III.  Гидразина сульфат, насыщенный раствор, готовят, заливая 2,5 г препарата 100 мл воды.

IV.  Раствор сульфонированного батофенантролина: в пробирке к 100 мг батофенантролина (4,7-дифенил-1,10-фенантролина) приливают 0,5 мл хлорсульфоновой кислоты, нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 сек., охлаждают и медленно приливают 10 мл воды, после чего снова нагревают на водяной бане в течение 5 мин и разбавляют 100 мл воды, добавляя 5 н NaOH, устанавливают рН 4,0 и доводят объем водой до 200 мл.

V.  Калибровочный раствор железа, содержащий 30 мкмоль/л. Сначала готовят раствор соли Мора (железо-аммиачные квасцы, аммонийжелезо II сернокислое), FeSO4 * (NH4)SO4 * 6H2O, содержащий 3 ммоль/л, растворяя 1,178 г в 5 мл 0,3 н НСl и доводя объем до 1 л водой, содержащей в 1 л 1 мл концентрированной серной кислоты. Этот раствор разводят подкисленной водой в 100 раз, получается раствор, содержащий 30 мкмоль/л, или 1,67 мкг/мл.

Далее по теме: