Определение адениловых нуклеотидов эритроцитов методом тонкослойной хроматографии

Принцип метода

Белки эритроцитов осаждаются хлорной кислотой, избыток которой удаляется в виде калиевой соли. Безбелковый фильтрат хроматографируется в тонком слое на пластинах «Силуфол», нуклеотиды идентифицируются в ультрафиолетовом свете и определяются по светопоглощению элюатов.

Необходимые реактивы

I.  Диоксан.

II.  Изопропиловый спирт.

III.  Аммиак, концентрированный раствор.

IV.  Кислота хлорная, 0,8 н (8%-ная НСlО₄).

V.  Калия карбонат, раствор 2 моль/л готовят, растворяя 27,6 г карбоната калия (поташ, К2СО3) в воде, объем доводят до 100 мл. В случае необходимости препарат предварительно сушат при температуре 105—110 °С.

VI.  Подвижная фаза для хроматографии — смешивают 40 мл диоксана, 20 мл изопропилового спирта, 40 мл воды и 10 мл концентрированного раствора аммиака. Можно использовать и более простую систему, которую готовят без изопропанола, смешивая 40 мл диоксана, 40 мл воды и 10 мл раствора аммиака.

VII.  НСl, 0,1 н.

VIII.  Натрия хлорид, 0,85%-ный раствор (изотонический раствор).

IX.  Пластины для тонкослойной хроматографии «Силуфол».

---

• Концентрация фосфора в крови
• Определение неорганического фосфора
• Определение неорганического фосфора (ход исследования)
• Метод определения фосфора по образованию окрашенного комплекса малахитового зеленого с фосфорномолибденовой кислотой
• Определение липидного фосфора
• Определение липидного фосфора (ход исследования)
• Определение нуклеотидов эритроцитов электрофоретическим методом
• Определение нуклеотидов эритроцитов электрофоретическим методом (ход исследования)
• Определение адениловых нуклеотидов эритроцитов методом тонкослойной хроматографии (ход исследования)