Метод определения активности АЛТ (ход определения)

Ход определения

Перед определением температура растворов и сыворотки должна быть доведена до температуры измерения. Перед работой можно готовить смесь реактивов, состоящую из субстратно-буферного раствора, раствора НАДН и ЛДГ в соотношении 60 : 1 : 1.

Перемешивают, через 60 сек. (лаг-фаза) измеряют экстинкцию и одновременно включают секундомер. Точно через 1, 2, 3 мин (или через более короткие, но равные промежутки времени) измеряют экстинкцию. Измерение опытной и холостой проб проводят против воды при 340 нм в кювете с толщиной слоя в 1 см.

Поправку на холостой опыт проводят по формуле:

(ΔΕ/Δt)_оп – (ΔΕ/Δt)_хол = (ΔΕ/Δt)_скор.

Скорректированную величину опытной пробы используют в дальнейших расчетах.

Расчет производят по формуле:

активность, моль/(с∙м³) = нмоль/(с∙л) * 10⁶ = V/ε * 1∙V * (ΔΕ/Δt)_скор.

Условные обозначения те же, что для определения АсАТ.

Примечание

Определение активности фермента можно проводить по микрометоду. Для этого перед работой готовят смесь реактивов, состоящую из субстратно-буферного раствора, растворов НАДН и ЛДГ в соотношении 60 : 1 : 2.

Опытная проба включает: смесь реактивов — 0,630 мл, сыворотку — 0,10 мл, α-кетоглутаровую кислоту — 0,02 мл. Определение проводят по той же схеме, что и в макрометоде.

---

• Методы исследования активности лактатдегидрогеназы (клинико-диагностическое значение)
• Метод исследования активности щелочной фосфатазы (ЩФ)
• Метод исследования активности щелочной фосфатазы (необходимые реактивы)
• Метод исследования активности щелочной фосфатазы (ход определения)
• Метод исследования активности креатинкиназы (КК)
• Метод исследования активности креатинкиназы (необходимые реактивы)
• Метод исследования активности креатинкиназы (ход определения)
• Метод исследования активности креатинкиназы (клинико-диагностическое значение)
• Методы исследования активности лактатдегидрогеназы (ЛДГ)
• Методы исследования активности лактатдегидрогеназы (необходимые реактивы)