Изосерологические исследования крови
Реакция конглютинации вызывается неполными антителами. Эти антитела проявляют свою активность только в коллоидных средах, в частности в 20%-ном растворе бычьего альбумина, поэтому они имеют и второе название — белковые антитела. Однако вместо бычьего альбумина для постановки реакции можно применять обычную сыворотку крови человека, 10%-ный раствор желатины, полиглюкин и другие высокомолекулярные соединения. Схема реакции конглютинации R. …
Прежде чем приступить к исследованию резус-принадлежности крови, необходимо тщательно подготовить рабочее место. Резус-принадлежность определяется в хорошо освещенной комнате. Можно использовать источник рассеянного искусственного света: настольную лампу с матовым абажуром или настольную лампу и лист белой бумаги, который служит отражающим экраном. Для определения резус-принадлежности необходимо иметь штатив со стандартными сыворотками, с помощью которых производится первый этап …
Подготовительные мероприятия для исследования сыворотки на наличие в ней резус-антител и определение высоты их титра, по существу, не отличаются от изложенных в предыдущем разделе («Исследование неполных резус-антител методом конглютинации на чашках Петри»). Кровь для исследования и приготовления стандартных резус-положительных и резус-отрицательных эритроцитов берется в пробирки без стабилизатора. В качестве стандарта используются эритроциты, оставшиеся на дне …
Кровь для исследования берется без стабилизатора, в количестве 5 — 10 капель в центрифужную пробирку. Сразу после взятия крови в пробирку доверху наливается физиологический раствор хлористого натрия и тщательно перемешивается переворачиванием. Пробирка помещается в центрифугу и центрифугируется до полного осаждения эритроцитов (приблизительно 5 мин). После этого надосадочная жидкость по возможности полно удаляется и пробирка снова …
При отрицательном результате капля остается равномерно окрашенной в красный цвет. Отрицательный результат означает, что в сыворотке реципиента не содержится неполных антител, которые агглютинируют эритроциты данного образца донорской крови. Такая кровь считается совместимой и может быть использована для переливания. При положительном результате в капле видна агглютинация, степень выраженности которой может быть весьма различной. Положительный результат означает, …
Проба Кумбса основана на свойствах неполных блокирующих антител. Блокирующие антитела имеют, по-видимому, только одну активную гаптотрофную группу, способную прочно фиксироваться на антигенных детерминантах эритроцитов. Фиксация блокирующих антител на эритроцитах настолько прочна, что они не удаляются после многократных отмывок сенсибилизированных эритроцитов физиологическим раствором хлористого натрия и выявляются в антиглобулиновой пробе. Вторая гаптотрофная группа блокирующих антител не …
Определение резус-принадлежности производится на водяной бане при температуре в среднем +46°. Лучше всего иметь водяную баню, поддерживающую заданную температуру автоматически. Однако при ее отсутствии в качестве водяной бани можно использовать любой достаточно широкий сосуд, в который можно поместить 5 — 10 л воды. Сосуды меньшей емкости использовать в качестве водяной бани нет смысла, так как …
В штатив тремя рядами устанавливаются лабораторные пробирки высотой приблизительно 100 мм. Все пробирки каждого ряда нумеруются по порядку слева направо. Таким образом, под каждым номером будет значиться по три пробирки, расположенные одна за другой. Во все пробирки согласно их нумерации вносится по 2 капли исследуемой сыворотки. При этом необходимо помнить, что порядковый номер исследуемой крови …
Для приготовления контрольных сенсибилизированных эритроцитов в пробирку вносятся 3 капли стандартной сыворотки антирезус, содержащей неполные антитела, и 1 капля отмытых эритроцитов. Содержимое пробирки тщательно перемешивается встряхиванием, и она помещается на 30 мин в термостат при температуре +37°. По окончании инкубации сенсибилизированные эритроциты трижды отмываются физиологическим раствором хлористого натрия по описанной ранее методике. При невозможности ставить …
Наиболее точные результаты выявления неполных иммунных антител достигаются применением непрямой пробы Кумбса. Из технического оснащения для подбора крови этим методом необходимо иметь прежде всего лабораторную центрифугу и термостат, из реагентов — антиглобулиновую сыворотку Кумбса. Кровь реципиента берется в количестве 8 — 10 мл в пробирку без стабилизатора. Эритроциты донорской крови берутся из контрольных пробирок. В …
