Подготовка к определению титра неполных блокирующих резус-антител методом непрямой пробы Кумбса не отличается от подготовки к определению наличия резус-антител в исследуемой сыворотке. В штативе устанавливаются 10 пробирок диаметром 6 — 8 мм, высотой 80 — 100 мм, на которые наносятся обозначения титра от 1:2 на первой до 1:1024 на последней пробирке. При необходимости произвести титрование …
Для контроля активности и специфичности антиглобулиновой сыворотки необходимо параллельно с исследованием ставить контроль с сенсибилизированными и несенсибилизированными стандартными резус-положительными эритроцитами. Сенсибилизация эритроцитов производится сывороткой антирезус, в которой заведомо содержатся неполные блокирующие антитела антирезус. Результат учитывается через 5 мин по наличию или отсутствию реакции агглютинации в каплях исследуемых сывороток со стандартными резус-положительными и резус-отрицательными эритроцитами. При …
После инкубирования смеси исследуемых сывороток со стандартными эритроцитами последние трижды отмываются в физиологическом растворе. Для этого все пробирки доливаются доверху физиологическим раствором и их содержимое перемешивается путем переворачивания. После этого пробирки центрифугируются при 1000 — 1500 об/мин до полного осаждения эритроцитов (обычно 5 мин). Затем надосадочная жидкость полностью удаляется путем отсасывания и пробирка снова наполняется …
Кровь берется в пробирки в среднем по 5 мл, без стабилизатора. При хранении сывороток возможно снижение титра резус-антител, поэтому исследование старых сывороток может дать неправильный результат. Если исследование сыворотки в день взятия крови невозможно, ее необходимо законсервировать кристаллической борной кислоиз расчета 4% консерванта и хранить в холодильнике при температуре +4°. Для того чтобы исключить высыхание …
В лечебных учреждениях Советского Союза для определения неполных блокирующих резус-антител и их титра применяется проба Кумбса в модификации Центрального научно-исследовательского института переливания крови. Исследование непрямой пробой Кумбса неполных антител состоит из двух самостоятельных манипуляций: определения наличия и определения титра неполных блокирующих резус-антител. Оба исследования могут производиться одновременно. Определение неполных блокирующих резус-антител в крови сенсибилизированных к …
В штатив устанавливаются рядами, по числу исследуемых образцов сывороток, пробирки с обозначениями ступени разведения от 1:2 до 1:1024. Во все пробирки вносится по 2 капли физиологического раствора хлористого натрия, который в этом случае играет роль разводителя. В первую пробирку этой же пипеткой вносятся 2 капли исследуемой сыворотки. Содержимое пробирки тщательно перемешивается, 2 капли смеси переносятся …
Результат учитывается просматриванием пробирок сразу же после их переворачивания в проходящем свете (на фоне окна или света матовой лампы). При положительном результате в пробирке видны агглютинаты в виде взвешенных крупинок или хлопьев. Содержимое пробирок при этом в некоторой мере обесцвечивается. При отрицательном результате содержимое пробирок остается окрашенным в равномерный розовый цвет и признаков агглютинации не …
В штатив тремя рядами устанавливаются лабораторные пробирки высотой приблизительно 100 мм. Все пробирки каждого ряда нумеруются по порядку слева направо. Таким образом, под каждым номером будет значиться по три пробирки, расположенные одна за другой. Во все пробирки согласно их нумерации вносится по 2 капли исследуемой сыворотки. При этом необходимо помнить, что порядковый номер исследуемой крови …
Подготовительные мероприятия для исследования сыворотки на наличие в ней резус-антител и определение высоты их титра, по существу, не отличаются от изложенных в предыдущем разделе («Исследование неполных резус-антител методом конглютинации на чашках Петри»). Кровь для исследования и приготовления стандартных резус-положительных и резус-отрицательных эритроцитов берется в пробирки без стабилизатора. В качестве стандарта используются эритроциты, оставшиеся на дне …
Результат учитывается в проходящем свете. Для этого чашку Петри помещают над источником рассеянного света (лампа с матовым абажуром) и осторожно покачивают вращательными движениями, чтобы отделить осевшие на дне эритроциты. При положительном результате видны различной степени выраженности агглютинаты — от мелкого песка до крупных хлопьев. При отрицательной реакции капли остаются окрашенными в красный цвет и признаков …





