Оно является одним из наиболее надежных видов стерилизации. Прокаливание осуществляется в муфельных или тигельных печах нагреванием объекта до 500—800 °С или же его прокаливанием на прямом огне. Применяются для стерилизации фильтров, фарфоровых чашек и т.д. Стальные предметы стерилизовать этим способом нельзя, так как они теряют закалку и ржавеют.