В постановке диагноза имеют значение клинические и эпидемиологические данные. Ведущий клинический симптом дифтерии — наличие фибриновых, плотных белесовато-сероватых пленок на поверхности слизистых оболочек или на коже.
Применяют также бактериологический метод — посев мазков из носа и глотки на элективные среды.
Из серологических методов используют РИГА для обнаружения нарастания титра антител в динамике болезни.