Бактериологическое исследование — серозно-кровянистую жидкость из язвы вносят на среду ННН (агар + поваренная соль + дефибринированная кровь кролика).
Засеянные пробирки выдерживают при температуре 22-25 °С. Для предотвращения высыхания среды ватные пробки пробирок заливают горячим парафином. Рост в виде мелких прозрачных колоний, впоследствии сливающихся, обнаруживаются на 3-4-й день. Без пересева культуру можно сохранить 3-4 недели и дольше. При посеве с поверхности агара петлей снимают отдельные колонии и засевают в пробирки со свежей средой на поверхность агара. В культуре лейшмании представлены в виде лептомонадных форм. Они имеют удлиненное ланцетовидное тело размером 10-14 х 4-5 мкм с ядром в средней части тела и блефаропластом, лежащим около переднего конца тела паразита. От блефаропласта, начинается свободно выходящий через передний конец тела клетки жгут, в 1,5 раза длиннее тела паразита. Часть лептомонадных форм часто собирается в розетки (жгутами к центру) по 10-15 экземпляров. В старых культурах наблюдаются формы, лишенные жгута, в виде овальных, иногда круглых образований размером 4 х 5 мкм.
Серологические исследования — используются реакция связывания комплемента (РСК), иммуноферментная агглютинация (ИФА).