Принцип метода
Белки эритроцитов осаждают трихлоруксусной кислотой, надосадочную жидкость подвергают электрофорезу на бумаге в цитратном буфере рН 5,1. Пятна АТФ и АДФ идентифицируют в ультрафиолетовом свете, вырезают, элюируют и количественно определяют прямой спектрофотометрией в ультрафиолетовом свете при длине волны 260 нм.
Необходимые реактивы
I. Натрия цитрат трехзамещенный.
II. Гепарин, ампулированный препарат, активность 5000 ЕД/мл.
III. Натрия хлорид 0,85%-ный раствор (физиологический раствор);
IV. Кислота трихлоруксусная 150 г/л (15%-ный раствор).
V. НСl 0,01 н.
VI. Цитратный буфер рН 5,1, готовят, растворяя в воде 17,65 г натрия цитрата трехзамещенного и 4,41 г лимонной кислоты. Объем доводят до 1 л.
VII. Бумага для электрофореза, разрезанная на ленты 35 * 200 мм.