Выявление нарушений обмена веществ (обнаружение пролина и других аминокислот)

Пролинурия возможна при патологии почек и как симптом наследственного нарушения обмена.

Принцип метода: изатин образует с некоторыми аминокислотами специфически окрашенные соединения.

Необходимые реактивы:

изатин;
ацетон;
раствор изатина в ацетоне 0,2 г/л (раствор хранят в холодильнике при температуре 4 °С;
соляная кислота 1 моль/л.

Ход исследования

Фильтровальную бумагу пропитывают раствором изатина в ацетоне и высушивают. Затем наносят на нее 1 каплю мочи и высушивают при 100 °С в течение 10 мин, смачивают раствором соляной кислоты и промывают водой.

Сине-серую окраску дает повышенное содержание фенилаланина, коричневую — триптофан, пурпурную — смесь различных аминокислот, а появление синей окраски в виде ободка свидетельствует о присутствии в моче свободного пролина (не менее 0,1 мг/мл). Можно сравнивать интенсивность окраски с цветной шкалой. Для приготовления стандартных растворов, содержащих от 0,1 до 0,5 мг/мл соответствующих аминокислот, используют растворы аминокислот с исходной концентрацией 0,5 мг соответствующей аминокислоты в 1 мл раствора.

Далее по теме: