Определение белка - Химическое исследование - Исследование спинно-мозговой жидкости - Справочник по клинической лабораторной диагностике - Medkurs.ru - медицинский сервер
Питание и здоровье
Питание и здоровье

Особенности питания различных групп людей

Медицина в фото
Медицина в фото

Уникальные медицинские фото: органы, болезни, паразиты

Планирование беременности и зачатие
Планирование беременности

Рождение ребенка – важный шаг в жизни каждой семьи

Справочник по психиатрии
Справочник по психиатрии

Симптомы, диагноз, развитие, лечение

Определение белка

Определение белка осуществляется унифицированным методом с сульфациловой кислотой и на биохимическом анализаторе.

Нормальное содержание белка в спинномозговой жидкости варьирует в пределах:

  • при поясничной пункции — 0,22—0,33 г/л;
  • при цистериальной пункции — 0,1—0,22 г/л;
  • при вентрикулярной пункции — 0,12—0,2 г/л.

Унифицированный метод определения белка с сульфациловой кислотой и сульфатом натрия. Интенсивность получения при коагуляции белка сульфациловой кислотой пропорциональна его концентрации.

Необходимые реактивы

I.  6%-ный раствор сульфациловой кислоты.

II.  14%-ный раствор безводного сульфата натрия.

III.  Стандартный раствор альбумина — 1%-ный раствор: 1,0 мл альбумина (из человеческой или бычьей сыворотки) растворяют в небольшом количестве 0,9%-ного раствора хлорида натрия в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объем раствором хлорида натрия до метки. Реактив нестойкий. Для стабилизации к стандартному раствору прибавляют 1 мл 5%-ного раствора азидида натрия. В этом случае при хранении в холодильнике реактив годен к употреблению в течение 2 месяцев.

IV.  1 мл раствора альбумина.

V.  0,9%-ный раствор хлорида натрия.

Специальное оборудование: фотоэлектроколориметр.

Для анализа применяют свежеприготовленную смесь равных объемов 6%-ного раствора сульфациловой кислоты и 14%-ного раствора безводного сульфата натрия (рабочий раствор). В пробирку наливают 5 мл свежеприготовленного рабочего раствора и 0,5 мл ликвора. Тщательно перемешивают. Через 10 мин интенсивность помутнения измеряют на фотоэлектроколориметре в кювете с длиной оптического пути 1 см против контроля, длина волны 410—480 нм (сине-фиолетовый светофильтр). В контроль вместо реактива берут 0,9%-ный раствор хлорида натрия. Расчет ведут по калибровочному графику.

Построение калибровочного графика: из стандартного раствора готовят разведения и обрабатывают их, как опыт. В 5 пробирок наливают 0,1; 0,2; 0,5 и 1 мл стандартного раствора альбумина и в каждую из них доливают до объема 10 мл 0,9%-ного раствора хлорида натрия. Концентрация белка в этих растворах соответственно 0,05, 0,1, 0,2, 0,5 и 1,0 г/л.

Примечания

I.  Если муть начинает оседать, перед измерением пробирку необходимо встряхнуть.

II.  Перед определением целесообразно поставить реакцию Панди, и если результат реакции оценивают — 3+ или 4+, то перед началом количественного исследования ликвор надо развести изотоническим раствором хлорида натрия и при расчете учесть степень разведения.

III.  Прямолинейная зависимость при построении калибровочного графика сохраняется до 1 г/л, поэтому при более высоких концентрациях белка ликвор следует разводить.

Повышенное содержание белка отмечают при нарушении гемодинамики, воспалительных процессах, органических поражениях центральной нервной системы и оболочек мозга, при экстрамедуллярных опухолях спинного мозга. Пониженное содержание белка отмечается при гидроцефалии и повышенном образовании ликвора.

Большое практическое значение придается определению белкового индекса, отношению глобулинов к альбуминам. Белковые фракции определяются методом электрофореза.

Далее по теме: